Tecnicas de tincion del Sistema Nervioso

Técnicas especiales para Sistema Nervioso y resultados que aportan a su estudio.

TÉCNICA DE NISSL:
Es una técnica de basofilia como una coloración con hematoxilina. El fundamento de la tinción es el uso de un colorante básico (azul de toluidina, azul de metileno, violeta de cresilo) que, en un medio ácido (pH 3) reacciona con los grupos
fosfatos de los ácidos nucleicos.
Resultado: Se tiñen los núcleos de todas las células (neuronas y células gliales) y la sustancia de Nissl (ribosomas libres
y asociados a membranas de neuronas).
¡¡No se tiñen los axones!!, por carecer de ARN en su interior.
Es la técnica utilizada para el estudio de detalles citológicos y citoarquitectónicos.


TÉCNICA DE GOLGI
Esta técnica fue la precursora de todas las técnicas de impregnación argéntica. La impregnación se realiza sobre el tejido fijado en bloque (o sea sin cortarlo previamente) en dicromato de potasio y posterior impregnación con nitrato de plata. Luego se lo incluye en celoidina y se lo corta. Actualmente no está todavía claro el fundamento de esta técnica. Resultado: Se observan neuronas, glía y vasos de color negro sobre un fondo amarillo de especto semejante al acrílico.
La coloración es selectiva, impregnándose entre el 5 y el 20 % de las neuronas y células gliales; pero las que lo hacen,
se impregnan completamente, con todas sus prolongaciones.
Se utiliza para el estudio de campos dendríticos y colaterales axonales. No se observan detalles citológicos.


TÉCNICA DE CAJAL
Técnica de impregnación argéntica, la impregnación se hace con nitrato de plata y la reducción con solución reductora
de Cajal (hidroquinona, formol y acetona). Posteriormente se realiza un viraje con una solución diluida de cloruros de oro.
Resultado: Neurofilamentos y neurotúbulos del soma, axones y dendritas, se observan formando un artificio llamado
neurofibrillas, de color marrón. El núcleo es negativo, de un color amarillo pálido. Las prolongaciones neuronales y gliales y algunos vasos aparecen impregnados de color marrón.
Permite el estudio de prolongaciones neuronales, dando una imagen más completa del tejido nervioso. No es posible observar detalles citológicos ni el núcleo celular.¡¡Posibilita observar el neuropilo!!


MÉTODO DE CAJAL CON ORO SUBLIMADO
El sublimado de oro es una solución mezcla de cloruro de mercurio y cloruro de oro que precipita sobre los
gliofilamentos.
Resultado: los astrocitos y sus prolongaciones aparecen impregnados de color negro. El fondo es habitualmente incoloro o marrón, algunas veces se observa de color púrpura.


MÉTODO DE DEL RÍO HORTEGA
Empleado para astrocitos. Utiliza nitrato de plata y carbonato de litio, formando un precipitado de carbonato de plata;
éste se reduce con formol y vira con cloruro de oro.
Resultado: los astrocitos se observan de color negro y bien delimitados, con sus prolongaciones de color negro y fondo amarillo.
Existen además, variantes de esta técnica para la demostración de oligodendroglía y microglía (carbonato de plata
débil).

TÉCNICAS PARA MIELINA
Colorean la mielina pero no el axón, el cual da una imagen negativa.

MÉTODO DE WEIGERT:
Utiliza la hematoxilina con el agregado de un mordiente y cloruro férrico.
Resultado: se tiñen las lipoproteínas de la banda de mielina de color violáceo o negro, sobre un fondo incoloro o amarillo pálido.

TÉCNICA DE KLUVER BARRERA:
Utiliza dos colorantes: violeta de cresilo (básico) y luxol fast blue (con afinidad por los lípidos de la vaina de mielina).
Resultado: se tiñe la mielina de azul y los núcleos y la sustancia de Nissl de violeta.

MÉTO DO DEL TETRÓXIDO DE OSMIO:
El osmio reacciona con los lípidos a nivel de sus enlaces insaturados.
Resultado: La vaina de mielina se tiñe de negro por su alto contenido de lípidos insaturados.

Obtenido en HiSTOMANCiA - http://ar.groups.yahoo.com/group/histomancia/
Transcripto por Hernán (drhernanrb@hotmail.com)