Estudio Preliminar del Timo Humano

ANTECEDENTES

El timo es una glándula clave en la constitución del sistema inmunológico por ser el órgano de maduración de
los linfocitos T; células imprescindibles por su actividad en la inmunidad celular .Se desarrolla a partir de la
5ª semana, de esbozos del intestino faríngeo en forma de rudimento epitelial de origen endodérmico . Células oriundas del hígado y médula ósea colonizan el órgano. A partir de allí, el desarrollo es progresivo, llegando a
su máxima expresión aproximadamente a los 10 (diez) años; para luego comenzar a involucionar en la pu- bertad ,momento en que el órgano disminuye su volúmen y su parénquima es reemplazado parcialmente por tejido adiposo .
Desde el punto de vista histológico es un órgano encapsulado , bilobulado . La cápsula presenta tejido conec- tivo denso, irregular que envía tabiques a los lóbulos y los subdivide en lobulillos incompletos. Cada lobulillo presenta corteza y una médula común, estroma retículo epitelial y un parénquima predominantemente linfoci- tario .
En la zona cortical se agrupan densamente la mayoría de los timocitos inmunoincompetentes en fase de proli- feración, mientras que en la médula se ubican los inmunocompetentes, lo que implica que existe un gradiente
de diferenciación de la corteza a la médula.
Contiene diferentes tipos celulares de acuerdo a su estructura , función y fenotipo:
-Células epiteliales corticales :
-Células epiteliales reticulares de tipo I: separan la corteza de la cápsula de tejido conectivo y a las trabé- culas ,y rodean a los elementos vasculares de la corteza .Los núcleos polimorfos y nucleolos evidentes.
- Células epiteliales reticulares de tipo II :localizadas en la corteza media ,poseen largas proyecciones a manera de vainas que dividen la corteza tímica en compartimientos pequeños llenos de linfocitos. Los núcleos son grandes, pálidos y con poca heterocromatina. El citoplasma es pálido y con abundantes tono-filamentos.
- Células epiteliales reticulares de tipo III :localizadas en la parte profunda de la corteza y a nivel de la unión cortico-medular, con amplias proyecciones a manera de vainas que forman compartimentos llenos de linfocitos. Permiten aislar corteza y medula. Citoplasma y núcleos más densos .
La médula ,de color mucho más claro que la corteza, contiene una población de linfocitos no tan profuso y gran número de células epitelio- reticulares (interdigitadas).
-Células epiteliales reticulares de tipo IV : se encuentran en la región cortico-medular. Los núcleos presen- tan cromatina burda .El citoplasma es oscuro y rico en tono-filamentos.
-Células epiteliales reticulares de tipo V: forman el citorretículo de la médula. Núcleos polimorfos, bien definidos y cromatina perinuclear evidente.
-Células epiteliales reticulares de tipo VI : presentan núcleo eucromático con un nucleólo prominente, citoplasma pálido. Estas células forman estructuras típicas y características del timo: los corpúsculos de Hassall , son de aspecto redondeado, compuestos por células que se disponen conformando láminas concén- tricas, las que pueden presentar necrosis o queratinización.


MATERIAL Y MÉTODOS

- Se obtuvieron timos humanos de individuos en distintas etapas del desarrollo, provenientes del laboratorio privado de anatomía patológica del Dr. Cerdera Noguera y de la morgue judicial .
-Se los clasificaron en 3 grupos etarios diferentes :
Estrato A : Nacimiento hasta 5 años. Estrato B : Niño de 5-10 años Estrato C : Adulto
- Se los fijó en formol tamponado durante 48 hs
- Se procesaron siguiendo la técnica histológica de rutina.
Se obtuvieron seis (6) cortes en forma aleatoria de cada taco. El espesor de cada uno de ellos fue de 5 a 7
micras.
- Se realizó la tinción de los cortes utilizando la técnica hematoxilina - eosina, observando con microscopio óptico las preparaciones.
-Se seleccionó el más representativo de cada estrato y con ellos se realizaron técnicas de inmunoperoxidasa utilizando como sistema de detección: avidina-biotina y como revelador diaminobencidina. Los anticuerpos monoclonales utilizados para la determinación de los distintos tipos celulares fueron:
UCHL-1 (CD45RO): marcador de timocitos.
CD68 : marcador de histiocitos.
AE1-AE3 (CK): marcador de citoqueratinas en células epiteliales.
S-100: marcador de células retículo-epiteliales e histiocitos.
ACL: antígeno leucocitario común.


RESULTADOS

Los resultados obtenidos por medio de la observación microscópica fueron:

-Estrato A : niño de 10 (diez) meses, sano (muerte accidental). Con la técnica de hematoxilina- eosina se observa una muy delgada cápsula de tejido conectivo que emite gran cantidad de trabéculas .La población linfocitaria es abundante y se notan los distintos estadíos de proliferación de éstas células.
Hay una notoria definición entre la zona cortical y medular . Se evidencian las células retículo-epiteliales, con
las características nucleares y ubicación, descriptas en el órgano . Se visualizan corpúsculos de Hassall en su mayor parte con la estructura conservada y sobresalen algunos con aspectos pseudoquísticos.
Con la técnica de inmunoperoxidasa se observó: positividad en el componente retículo-epitelial y en corpús- culos de Hassall con AE1 - AE3, en linfocitos presentes con ACL y UCHL-1 (CD45RO), en histiocitos con CD 68 y S-100 y en células reticulo-epiteliales interdigitadas también con S-100

-Estrato B : niño de 10 (diez) años , sano (muerte accidental). Con la técnica de hematoxilina - eosina se observa que el timo presenta una estructura conservada , donde se destaca predominio de la cortical sobre la medular, con células linfocitarias
proliferantes. En la corteza, se visualizan células reticulares tipo I y de tipo II. Ambas conservan las caracte- rísticas histológicas descriptas anteriormente.
Se observan numerosas formaciones pseudoquísticas bien delimitadas, de hasta 300 (trescientos) micróme- tros conteniendo material amorfo ; en muchos de ellos aparecen focos de calcificación distrófica y escasos corpúsculos de Hassall típicos ( células reticulares de tipo VI).
Con la técnica de inmunoperoxidasa se observó: positividad en el componente retículo-epitelial y en corpús- culos de Hassall con AE1 - AE3, en linfocitos presentes con ACL y UCHL-1 (CD45RO), en histiocitos con CD 68 y S-100 y en células reticulo-epiteliales interdigitadas también con S-100

-Estrato C: hombre de 64 (sesenta y cuatro) años de edad, que presentó una pericarditis crónica. Se distin- guen islotes de tejido tímico con corteza y medula diferenciadas. Con la técnica de hematoxilina - eosina, se puede distinguir el órgano con un marcado reemplazo adiposo; zonas de tejido conectivo denso y otras de
tejido conectivo laxo, (trabéculas), éstas, en relación directa con los adipocitos y delimitando la zona cortical En. las trabéculas se pueden observar células retículo-epiteliales , lo mismo que en la zona medular. La pobla- ción linfocitaria está conservada en relación con la escasa cantidad de parénquima tímico. La población ma- crofágica es abundante.
Escasos corpúsculos de Hassall pequeños y compactos ; que conservan su estructura laminar concéntrica . Con la técnica de inmunoperoxidasa se observó: positividad en el componente retículo-epitelial y en corpús- culos de Hassall con AE1 - AE3, en linfocitos presentes con ACL y UCHL-1 (CD45RO), en histiocitos con CD 68 y S-100 y en células reticulo-epiteliales interdigitadas también con S-100


CONCLUSIONES

- La celularidad disminuye y es reemplazada por tejido adiposo en relación con la involución del órgano, quedando corpúsculos de Hassall rudimentarios pero con respuesta positiva al inmunomarcado (AE1- AE3).Disminuyen también las células reticulares interdigitadas .
-La presencia de los pseudoquistes encontrados , con marcada necrosis central , constituyen un aspecto mor- fológico de la involución de los corpúsculos de Hassall en las distintas edades..
-Si suponemos que los corpúsculos de Hassall, son derivados de las células interdigitadas, que algunos auto-
res las consideran nueroectodérrmicas ( derivadas de la cresta neural) y que se han marcado como tales en nuestro laboratorio ¿porque no se marcaron con S-100 los corpúsculos de Hassall , cuando lo lógico es que sean S100 positivos; interrogante que nos abren expectativas para nuevas líneas de investigación .
Si bien histológicamente hemos encontrado marcadas diferencias en los timos de distintas edades, coinciden-
tes con otros trabajos realizados , no encontramos con las técnicas de inmunomarcación diferencias significa- tivas; por lo que deducimos que el timo aún en etapa involutiva, conserva potencialmente su importancia funcional.


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Piuzzi, María L. - Cerdera Noguera, Américo - Soto de Ferrini Susana
Viudes, Laura - Thompson, Carlos - Rossi, Luis

Cátedra l de Histología y Embriología . Facultad de Medicina . U.N.N.E- Sargento Cabral 2001 (3400) Corrientes - Argentina
Tel.: +54 (03783) 439624